茶葉中黃曲霉毒素檢測方案

針對茶葉復雜基質，參考【GB 5009.22-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定】，建議實驗過程如下：

1檢測方法

1.1 第一法（液相色譜法-串聯質譜法）

黃曲霉毒素混合標準工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2為1：0.3：1：0.3ug/mL

黃曲霉毒素混合同位素內標工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2為0.5 ug/mL

稱取 5g試樣（根據樣品吸水性可調整）+50uL混合標準工作液+40uL混合同位素內標工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min（離心速度 4000r/min）→取上清液4mL過PriboFast®MFC160/260固相凈化柱→取2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液，使空氣進入柱子，將水擠出柱子→用2mL甲醇洗脫，收集洗脫液于試管中→50℃下氮氣吹至近干，用0.5mL流動相復容→微孔濾膜（0.22μm）濾過，取續濾液上機。

1.2 第二法（液相色譜法）

黃曲霉毒素混合標準工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2為1：0.3：1：0.3 ug/mL

稱取 5g試樣+50uL混合標準工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min（離心速度 4000r/min）→取上清液4mL過PriboFast®MFC160/260固相凈化柱→取2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液，使空氣進入柱子，將水擠出柱子→用2mL甲醇洗脫，收集洗脫液于試管中→50℃下氮氣吹至近干，用0.5mL流動相復容→微孔濾膜（0.22μm）濾過，取續濾液上機。

樣品來源：檢測樣品庫中，選取紅茶、綠茶各一種有代表性的茶葉，分別做兩種方法的本底和加標平行。