柱后衍生系統在河豚du素檢測的新應用

柱后衍生系統在河豚du素檢測的新應用

去年游族創始人遭人投毒致死，英年早逝令人惋惜。據某些報道稱其中的毒之一就是河豚du素。像這樣的河豚du素中毒事件在日常生活中也有發生。近日，廣東省衛健委通報的廣東三起較大級別的食物中毒事件中，其中兩起為河豚du素中毒，且中毒兩人均死亡。

什么是河豚du素呢

河豚du素（tetrodotoxin，TTX），分子式為C₁₁H₁₇O₈N₃，是鲀魚類（俗稱河豚魚）及其它生物體內含有的一種生物堿。

河豚du素為氨基全氫喹唑啉型化合物，是自然界中所發現的毒性最大的神經毒素之一，曾一度被認為是自然界中毒性強的非蛋白類毒素。這種毒素主要作用于腸道，被腸道吸收后便會迅速作用于神經末梢和神經中樞，可高選擇性和高親和性地阻斷神經興奮膜上鈉離子通道，阻礙神經傳導，從而引起神經麻痹而致死亡。
 

據調查顯示，河豚du素大部分存在于河豚當中，但是近幾年在蟾蜍、蠑螈、藍環章魚中也檢測到河豚du素的存在。越來越多的研究認為，河豚du素有可能是通過食物鏈傳播到海洋生物體內的，并不只和河豚有關。

河豚體內的毒性在各個部位不同，甚者季節也會影響河豚體內的毒性。據研究顯示，河豚在生殖季節毒性大，且雌性大于雄性，而在不同部位中，卵巢>脾臟>肝臟>血液>眼睛>鰓耙>皮膚>精巢。一般情況下，河豚的肌肉中是不含有毒素的，但河豚死后內臟中的毒素可少量地滲入肌肉中。
 

河豚du素化學性質和熱性質均很穩定，一般家庭中的烹飪條件不能將其破壞，只有在高溫加熱30min以上或在堿性條件下才能被分解。而能將其破壞的條件要求較高，為220℃加熱20-60min。這種的毒素的發病期很短，短至10-30min，長至3-6h發病，發病急，如果搶救不及時，中毒后最快的10min內死亡，最遲4-6h死亡。中毒后也缺乏有效的解救措施。所以，對于河豚du素的檢測尤為重要。
 

方法介紹

目前食品中河豚du素的檢測主要依據GB 5009.206-2016，包括小鼠生物法、液相色譜-串聯質譜法、液相色譜-熒光檢測法和酶聯免疫吸附法。其中小鼠生物法雖為世界普遍的參考方法，但存在小鼠個體差別大導致結果異常的現象；液相色譜-串聯質譜法儀器成本高，對操作人員水平要求嚴格；酶聯免疫吸附法屬于半定量方法且商品化試劑盒較少；故采用液相色譜-熒光檢測法。

為保證檢測結果更加精準可靠，普瑞邦特對該方法進行優化，采用諾爾液相搭配Pribolab^®MDS多功能光電衍生系統進行河豚du素的檢測。經液相色譜分離后，河豚du素在Pribolab^®MDS多功能光電衍生系統內與高溫的氫氧化鈉溶液反應，生成具有強熒光效應的C₉堿，熒光檢測定量限為300ppb，滿足國標要求。

實驗條件

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色譜柱: C ¹⁸ 柱,柱長 150mm ,內徑 4. 6mm ,粒徑 5 μ m ,或等效柱。

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流動相:乙腈 - 乙酸銨緩沖液( 5+95 ,體積比)。

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流速: 1. 0mL / min 。

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柱溫: 30℃ 。

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檢測波長:激發波長 385nm ,發射波長 505nm

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注：如需優化后的方法，請與我們聯系

譜圖

上圖為1ppm河豚du素柱后衍生產物熒光譜圖

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